聯(lián)系人：王經(jīng)理
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近年來，水產(chǎn)品硝基呋喃類藥物殘留超標事件屢屢發(fā)生，嚴重威脅著人民身體健康和我國水產(chǎn)品出口貿(mào)易。鑒于硝基呋喃類藥物殘留的嚴重危害，我國農(nóng)業(yè)部于２００２年４月發(fā)布１９３號公告，公布了《食品動物禁用獸藥及其他化合物清單》，規(guī)定硝基呋喃類抗生素在所有食品動物中禁止使用，２００３年又將水產(chǎn)品硝基呋喃代謝物納入殘留監(jiān)控計劃。
目前檢測水產(chǎn)品中的硝基呋喃類化合物，可參考的國標是農(nóng)業(yè)部783號公告-1-2006水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物殘留量的測定液相色譜－串聯(lián)質譜法。該方法將樣品肌肉組織中殘留的硝基呋喃類蛋白結合代謝物在酸性條件下水解，用2-硝基苯甲醛衍生化，然后經(jīng)乙酸乙酯液液萃取凈化后，LC-MS法檢測。該方法使用液液萃取提取，操作復雜耗時長，重現(xiàn)性差，回收率不穩(wěn)定。
本文采用HyperSep Retain PEP SPE小柱進行樣品前處理，操作簡單、省時、省力，能夠得到較高和穩(wěn)定的回收率。Retain PEP 前處理小柱對于4種硝基呋喃類藥物可實現(xiàn)0.05μg/kg的LOQ，遠遠高于國標方法的0.5μg/kg?；厥章试?9-110%之間，RSD在3-22%之間。使用Hypersil GOLD C18色譜柱，在LC/MS 上具有出色的峰形和分辨率。
樣品提取
2g 樣品中加入4mL 水，0.5mL 0.5M HCL， 加入200μL新鮮配制的50mM 鄰硝基甲苯的DMSO 衍生液，渦勻1min，在37℃水浴中避光衍生過夜（14-16 小時）。衍生后加入5mL 0.1M K2HPO4，用0.4 M NaOH調(diào)整PH到7.0-7.5，混勻后取上清液。
SPE操作步驟
60mg 3mL HyperSep Retain PEP 固相萃取柱( 貨號：60107-203):
活化
3mL 甲醇，3mL 水
上樣
樣品，1-2mL/min
清洗
5mL 水，2mL 30% 甲醇的水溶液
洗脫
5mL 乙酸乙酯
色譜條件：
色譜柱 Thermo Scientific Hypersil GOLD C18，5μm，100×2.1mm
貨號 25005-102130
流動相
A: 0.5mM 醋酸銨水溶液
B: 甲醇
梯度
進樣量 20μL
流速 250μL/min
質譜條件：
電噴霧電離源（ESI），正離子模式
選擇反應監(jiān)控（SRM）掃描模式
噴霧電壓 5000V
離子傳輸管度 300℃
回收率：4 種硝基呋喃類藥物回收率在79%-110%, RSD 在3 到22%（n=3）。
LOQ：AHD，AO，SEM，AMO 的LOQ 0.05μg/kg。
結論
Retain PEP 前處理小柱對于4種硝基呋喃類藥物可實現(xiàn)0.05μg/kg的LOQ，回收率在79-110%之間，RSD在3-22%之間,*農(nóng)業(yè)部783號公告-1-2006水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物殘留量的測定 液相色譜－串聯(lián)質譜法方法要求。
