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選擇Agilent液相色譜柱前,了解過它嗎
更新時(shí)間:2022-01-20   點(diǎn)擊次數(shù):1265次
  Agilent液相色譜柱以乙烯醇共聚物為基質(zhì)的色譜柱,即使其載炭量很高也能保持表面的濕潤。多孔結(jié)構(gòu)具有足夠大的平均孔徑,對(duì)小分子化合物、多肽和小分子蛋白能夠產(chǎn)生理想的分離效果。
 
  在有機(jī)溶劑比例較高的流動(dòng)相中,該柱具有與硅膠基質(zhì)色譜柱相同的柱效,但在堿性緩沖溶液為流動(dòng)相條件下,其分離效率則超過硅膠色譜柱。顯著的特點(diǎn)之一是基質(zhì)被烷基化的填料的洗脫順序,其保留能力與碳鏈長度成正比。
 
  在選擇Agilent液相色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等。
 
  1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測(cè),即要選擇承受100%純水且對(duì)極性化合物保留很好的色譜柱。
 
  2.如果樣品極性太強(qiáng),或酸性太強(qiáng);可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱。
 
  3.若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾,一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做,因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留。
 
  4.如果堿性化合物的極性太強(qiáng),或堿性太強(qiáng);可以選擇寬pH的Agilent液相色譜柱在高pH值檢測(cè)(優(yōu)點(diǎn)是方法開發(fā)簡單,缺點(diǎn)是目前實(shí)現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,價(jià)格也高)或者選用也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱。

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